细胞培养指南|SH-SY5Y细胞培养必读

SH-SY5Y细胞是广泛应用于神经生物学研究的经典人神经母细胞瘤细胞系，适用于神经分化研究、神经退行性疾病模型构建及药物毒性评估等领域。本文将为您提供SH-SY5Y细胞培养的关键注意事项，以助您在918博天堂的实验室中获得最佳效果。

一、SH-SY5Y细胞培养注意事项

1. 培养基与条件

基础培养基可选择DMEM或RPMI-1640，并需补充10-15%的胎牛血清（FBS）及1%双抗。培养环境应设置在37℃、5% CO₂和湿度饱和的条件下。换液频率建议为每2-3天换液一次，以防细胞因营养耗尽而影响生长。

2. 细胞传代

传代时，请使用0.25%胰酶（含EDTA）进行1-3分钟的消化，避免长时间消化导致细胞损伤。传代比例一般为1:3至1:6，按照细胞密度进行调整（当细胞达到80-90%融合时进行传代）。操作时需轻柔，以防止对SH-SY5Y细胞造成机械损伤。

3. 细胞状态监测

对细胞状态进行定期检查，健康的SH-SY5Y细胞呈现梭形或三角形形态，且通常聚集成簇生长。如果观察到细胞变圆、脱落或碎片增多，则需要关注细胞的健康状况并检查是否存在污染。应严格实施无菌操作，并定期检测支原体污染。

4. 冻存与复苏

冻存时可使用无血清细胞冻存液（WXQA100）。复苏时，应快速解冻并通过离心去除DMSO，然后进行高密度接种以提高细胞存活率。

二、常见问题与解决方案

在细胞培养过程中，可能会遇到一些问题。若发现细胞贴壁性差，可增加培养基中血清的比例（如调整至15% FBS），或采用多聚赖氨酸进行培养皿的包被。若细胞容易自发分化，建议避免其过度融合（控制在90%以内），并及时进行传代。

本实验室引进了来自ATCC、DSMZ、JCRB、中科院及国家干细胞资源库等多个来源的超过百种细胞种子。所有人源细胞系均提供STR鉴定报告，鼠源细胞系提供种属鉴定，并对鼠源细胞进行位点比对以确保STR鉴定的准确性。所有细胞已进行批量冻存，执行严格的代次管控，且经过无菌和无支原体检测，确保了细胞的高质量和可靠性。

谢谢您的阅读，期待在未来的研究中见证您与918博天堂的合作成果！